(六)培養(yǎng)
打開電源開關,打開氣泵,設定溫度至所需溫度,(應緩慢升溫)設定時間至最大值,打開過濾器上進氣閥門和進罐閥門和呼吸器上進氣閥和排氣閥,調節(jié)氣的翻騰度和壓力至0.03MPa,待壓力穩(wěn)定和溫度穩(wěn)定后(打開外套加熱開關)即可。
每天觀察館內料液的顏色,聞呼吸器排出的氣味并在火焰保護下取樣,劃平板,記錄,接取樣瓶,根據(jù)館內情況適當加大或減少通氣量。詳細流程請參考:的方法。
培養(yǎng)注意事項:
1,液體菌種接種以后培養(yǎng)過程中通氣時要先小量通氣,當培養(yǎng)液菌球數(shù)量達到50%以后再加大通氣量。
2,在液體菌種培養(yǎng)過程中從接種以后的每24小時取樣檢測一次。取樣的過程中要嚴格按照標準流程操作。杜絕取樣造成的2次污染。
3,鏡檢方法簡介如下:
無菌環(huán)境下取含有菌絲的培養(yǎng)液,放到載玻片上,在用蓋玻片蓋好,放到顯微鏡觀測架上可燃氣體報警器,通過目鏡調整適當倍數(shù)觀測菌絲形態(tài)結構液體接種槍的結構,是否有鎖狀聯(lián)合甲烷檢測儀,是否有細菌,病毒等不明微生物感染等情況。
(七)放液接種
看菌種的菌絲量,菌球量,當菌絲量達到90%以上時,平板檢測液體接種槍的結構,取樣瓶檢測無雜菌污染時方可接種。將接種管道消毒后與發(fā)酵罐在火焰保護下對接(管道用棉花塞住)接種槍與槍頭同樣在火焰下對接液體接種槍的結構,對接好的接種管道在調節(jié)好壓力時。打開出菌種閥門,將菌種從接種槍放出一部份,用量筒測試出10mL的時間,之后再兩到三人的配合下接種,接種時將槍頭插入料袋用力握槍,在所需時間內拔出并松開接種槍并蓋好料袋塞子(接種前接種室要提前消毒,接種時不得說話并戴口罩,手套,不得在接種室內走動)。
接種注意事項:
1,接種前要嚴格檢測液體菌種是否感染,保持疑似感染,堅決不用的原則。嚴格監(jiān)控菌齡,超齡菌種不宜使用。
2,接種過程中嚴格控制接入菌種量,定時校槍,預防空槍接種。
3,接種后控制培養(yǎng)溫度,不宜過低使液體菌種迅速萌發(fā),以保障成活率。
(八)清洗
使用完畢的發(fā)酵罐即時清洗,清洗時不得留死角,清洗完畢后加水至內層與外層的試鏡中心,加水完畢后蓋好壓緊待下次使用,定期檢查閥門,加熱管等是否正常。
簡述液體菌種后期發(fā)酵培養(yǎng)的制作過程和培養(yǎng)好以后的接種流程,關于液體菌種生產技術暫時告一段落,有不明白的朋友歡迎大家在【液體菌種200問】的文章下方留言討論。更多液體菌種生產技術資料可以點擊本文下方的相關鏈接查閱。
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